FLUOREYE‑ORO实现液体处理+荧光读取全流程整合

做过LDH细胞毒性实验的小伙伴一定深有体会：加试剂、控孵育时间、搬板到酶标仪读取信号手动操作、板片来回转移、孵育时间把控不一致，都会直接引入实验偏差，辛苦做出来的数据CV偏大，重复性差，高通量筛选场景下痛点尤为突出。

有没有方案，把试剂添加、孵育、荧光读数全部整合在自动化工作站上，不再需要来回搬运微孔板？

Hamilton 全新应用笔记给我们带来答案：基于 Microlab® STAR工作站搭配 FLUOREYE®‑ORO板载荧光检测模块，完成全自动LDH细胞膜完整性毒性分析。

实验背景：经典 LDH 毒性检测的痛点

LDH（乳酸脱氢酶）释放实验是细胞毒性、细胞膜损伤评估的经典手段：细胞膜破损后，胞内LDH释放至上清，催化底物生成荧光产物，荧光强度对应细胞损伤程度。

传统自动化流程短板： 

工作站完成加样孵育后，需要把微孔板取出，转运至外部酶标仪读数  

转运过程时间差、环境变化，给时间敏感型实验带来系统误差 

人工介入步骤多，高通量筛选时批次间重复性难以保障

FLUOREYE‑ORO板载荧光模块直接集成在 Microlab STAR工作站台面，无需移出微孔板，直接在工作站甲板完成荧光采集，真正实现 “加样‑孵育‑读数" 单平台闭环工作流。

实验方案：Digitonin诱导HeLa细胞损伤模型

本次实验采用Promega CytoTox‑ONE™均相细胞膜完整性检测试剂盒，以洋地黄皂苷Digitonin梯度处理HeLa细胞构建细胞膜损伤模型。

实验流程

HeLa细胞铺于黑色96孔板，过夜培养；

工作站自动施加0‑100 µg/mL梯度Digitonin处理5 min；

自动加入CytoTox‑ONE™反应试剂，室温孵育10 min；

自动添加终止液；

FLUOREYE‑ORO板载直接读取荧光（Ex 560 nm / Em 625 nm）；

同一块微孔板转移至传统酶标仪做对照比对（Ex 560 nm / Em 590 nm）。

FLUOREYE‑ORO关键参数支持自定义：LED功率、滤光片组合、测量高度、采集时长、背景扣除，全部在VENUS®软件内完成设置，适配不同检测体系。

实测数据：板载检测性能对标传统酶标仪

线性表现FLUOREYE‑ORO：R²=0.974；传统酶标仪：R²=0.981。两套设备均呈现荧光信号随Digitonin浓度升高而上升，复现剂量依赖性细胞膜损伤趋势。

重复性CV（变异系数）

FLUOREYE‑ORO平均 CV：1.15%

传统外置酶标仪平均 CV：3.15%

板载检测消除搬板操作，变异系数显著更低，数据一致性更强。

统计结果显示：低浓度药物组可以清晰分辨毒性差异；高浓度损伤平台期两组无显著性差异，与生物学预期保持一致。

方案核心优势总结

全流程一体化，无需搬板 试剂分配、孵育控时、荧光读数全部在 Microlab STAR台面完成，省去微孔板转运步骤，规避时间差带来的实验漂移。

降低人为干扰，提升可重复性 标准化液体处理 + 标准化计时 + 原位检测，减少人工介入，适合药物高通量细胞毒性筛选。

硬件模块化灵活切换FLUOREYE系列共用同一基座，仅更换移动检测头即可切换不同检测波长，适配多种荧光检测实验。

软件统一管控VENUS软件统一管理移液流程与荧光采集参数，自动完成空白、背景扣除，实验流程与数据溯源一体化。

本方案适合：化合物高通量毒性筛选、细胞膜损伤机制研究、细胞药物体外评价等细胞生物学实验场景。

LDH细胞毒性检测这类时间敏感型细胞实验，误差很多时候不是来自试剂盒，而是来自操作流程。FLUOREYE‑ORO板载荧光检测，把原来 “工作站+外置酶标仪" 两套设备的工作流收敛到一台平台，在保证检测性能的前提下，进一步释放自动化筛选的能力。